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Tipificación fenotípica y molecular de Staphylococcus aureus meticilino resistente y comparación de métodos para detectar resistencia a meticilina

Tipificación fenotípica y molecular de Staphylococcus aureus meticilino resistente y comparación de métodos para detectar resistencia a meticilina

La detección de resistencia a la meticilina en Staphylococcus aureus es complicada debido a la heterogeneidad de su expresión fenotípica, dificultando su diagnóstico en el laboratorio.

Objetivo: tipificar fenotípica y molecularmente Staphylococcus aureus meticilino resistente y evaluación de métodos para detectar resistencia a meticilina.

Tipificación fenotípica y molecular de Staphylococcus aureus meticilino resistente y comparación de métodos para detectar resistencia a meticilina

Gloria Inés Morales Parra (1)

Aracely García Cuan (2)

RESUMEN

Materiales y métodos: La resistencia a meticilina en 50 Staphylococcus aureus se evaluó con los métodos difusión en agar, microdilución en caldo y agar dilución utilizando los antibióticos oxacilina y cefoxitin. Se utilizó PCR convencional para verificar la presencia o ausencia del gen mecA. Se determinó la sensibilidad, especificidad, valores predictivos y eficiencia de cada método. Se realizó el análisis estadístico calculado ZC para comparar los resultados fenotípicos y moleculares.

Resultados: La resistencia a meticilina por métodos fenotípicos fue del 50% y 52%. 19 cepas se identificaron por PCR como portadoras del gen mecA. 9 cepas (18%), mostraron un fenotipo diferente a los resultados obtenidos por métodos moleculares y 7 de ellas se catalogaron con resistencia “borderline”. La sensibilidad de los métodos fenotípicos analizados fue de 90,4%, la especificidad oscilo entre 75,8% y 79,3%, el valor predictivo positivo entre 72% y 76%, el valor predictivo negativo entre 91,6% y 92% y la eficiencia entre 82% y 84%. El análisis estadístico mediante prueba de hipótesis demostró que los métodos fenotípicos presentan bajo riesgo de error para detectar la resistencia a meticilina en Staphylococcus aureus. Conclusión: El método difusión en agar presentó mayor eficiencia para detectar resistencia a meticilina. Es recomendable usar dos métodos alternativos que detecten todos los mecanismos que codifican la meticilino resistencia en Staphylococcus aureus, para instaurar una correcta terapia antimicrobiana.

Palabras clave: Staphylococcus aureus, meticilino resistencia, gen mecA.

  1. Magister en Microbiología Molecular. Docente Universidad de Santander (UDES), Universidad Popular del Cesar (UPC).Valledupar.
  2. Magister en Biología Molecular y Biotecnología. Universidad de Pamplona. Docente Universidad Libre de Barranquilla.

INTRODUCCIÓN

Staphylococcus aureus es una bacteria con alto grado de patogenicidad por los factores de virulencia que posee y además es responsable de una amplia gama de enfermedades localizadas y sistémicas (1). La aparición de cepas de Staphylococcus aureus con resistencia a meticilina (SARM) y antibióticos no beta-lactámicos, se ha convertido en un problema de salud pública, especialmente en el ámbito hospitalario, debido a la mayor morbi-mortalidad por las infecciones sistémicas causadas por esta bacteria (2). Las infecciones por este patógeno son relativamente altas con tasas cercanas al 40% para muchos países, incluyendo a Colombia y América Latina (3).

Su gran capacidad de adquirir elementos exógenos por transferencia horizontal, tanto dentro de la especie como con otras especies, le permite ser un patógeno exitoso y adaptarse fácilmente al medio y a los agentes antimicrobianos, mediante la adquisición de factores de resistencia a antibióticos codificados por plásmidos, secuencias de inserción y transposones. Dicha resistencia ha agudizado el problema mundial de las infecciones por esta bacteria. La detección de la meticilino resistencia por métodos fenotípicos habituales no es fácil ya que la expresión de la resistencia a oxacilina es compleja debido a las cepas con resistencia heterogénea, en la que una población minoritaria de células expresa el fenotipo de resistencia a meticilina (1%); por lo tanto, al realizar pruebas de susceptibilidad antimicrobiana hay que tener en cuenta variables como la concentración del inoculo, salinidad del medio del cultivo, temperatura y el tiempo de incubación, que influyen en la expresión del fenotipo resistente (4).

La rápida y precisa detección de los Staphylococcus aureus con resistencia a meticilina (SARM) es importante para guiar una apropiada terapia antibiótica y evitar la diseminación nosocomial y comunitaria de éstas cepas. Errores en la detección de la meticilino resistencia tienen graves consecuencias ya que un resultado de falsa sensibilidad puede dar lugar a una falla en el tratamiento, y un resultado de falsa resistencia implica un alto costo por tener al paciente aislado y el uso innecesario de glucopéptidos, con el consecuente riesgo de selección de cepas resistentes a este antibiótico (5). Dada la dificultad de los laboratorios de microbiología para detectar de manera confiable la resistencia a meticilina por métodos fenotípicos habituales, el objetivo de esta investigación fue tipificar fenotípica y molecularmente cepas Staphylococcus aureus meticilino resistentes y comparar los métodos para evaluar su efectividad en la detección de la resistencia a meticilina.

MATERIALES Y MÉTODOS

Se realizó un estudio descriptivo transversal. Se estudiaron 50 cepas de Staphylococcus aureus aislados de pacientes hospitalizados en el Hospital Rosario Pumarejo de