Resumen<\/b><\/p>\n
Se realiz\u00f3 un estudio experimental, con el objetivo de determinar la actividad antibacteriana de los extractos secos extra\u00eddos de las tinturas al 20% de ra\u00edces y flores de Turnera ulmifolia L, frente a dos cepas bacterianas de referencia internacional, Staphylococcus aureus ATCC 33862 y Streptococcus beta hemol\u00edtico del grupo A, ATCC 23491, productoras de piodermitis usando como disolvente dimetilformamida. Se trabaj\u00f3 con una concentraci\u00f3n m\u00e1xima de 0.4 mg\/mL por cada extracto.<\/p>\n
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Actividad antibacteriana de los extractos secos de Turnera ulmifolia L frente a bacterias productoras de piodermitis<\/b><\/p>\n
Autores:<\/p>\n
Msc. Lisbeth de los A. Mesa Guevara (1)<\/sup>, Msc. Javier A. Fr\u00edas Tamayo (1),<\/sup> Lic. Rolando Mar\u00edn Castro (1),<\/sup> Msc. Annielys Fonseca Garc\u00eda (2), <\/sup>Dra. Alicia Ch\u00e1vez S\u00e1nchez (1),<\/sup> <\/b>Msc. Grettel Montero Ram\u00edrez. (1)<\/sup><\/p>\n 1. Filial de Ciencias M\u00e9dicas Manzanillo, Cuba<\/p>\n 2. Universidad de Ciencias M\u00e9dicas de Granma, Cuba<\/p>\n La investigaci\u00f3n se realiz\u00f3 en tres etapas. La primera fue el tamizaje microbiol\u00f3gico mediante el m\u00e9todo de difusi\u00f3n radial en medio agarizado, la segunda estuvo dad por la determinaci\u00f3n de la Concentraci\u00f3n M\u00ednima Inhibitoria (CMI) por el m\u00e9todo anterior y la \u00faltima etapa fue la determinaci\u00f3n de la Concentraci\u00f3n M\u00ednima Bactericida (CMB) mediante el m\u00e9todo de diluciones dobles seriadas con pase a las 24 horas de incubaci\u00f3n a medio agarizado.<\/p>\n Se obtuvo como resultado que los extractos en estudio mostraron actividad no s\u00f3lo bacteriost\u00e1tica sino adem\u00e1s bactericida. Los valores de la concentraci\u00f3n m\u00ednima inhibitoria estuvieron en 0.1 mg\/mL frente a Streptococcus beta hemol\u00edtico del grupo A, ATCC 23491 para ambos extractos y frente a Staphylococcus aureus ATCC 33862 en 0.05 mg\/mL para el extracto proveniente de las flores y 0.1 mg\/mL para el extracto que se extrajo de las ra\u00edces. La concentraci\u00f3n m\u00ednima bactericida estuvo en 0.05 mg\/mL para ambos extractos en estudio.<\/p>\n Palabras clave<\/b>: Turnera, antimicrobianos, piodermias, tamizaje.<\/p>\n Introducci\u00f3n<\/b><\/p>\n Las enfermedades infecciosas han influido de forma determinante en la evoluci\u00f3n de la historia de la humanidad y son actualmente, la principal causa de mortalidad y morbilidad en el mundo, a pesar del descubrimiento de cientos de agentes antimicrobianos, cada d\u00eda m\u00e1s potentes, seguros y efectivos contra bacterias, virus, hongos y par\u00e1sitos. (1, 2, 3)<\/sup><\/p>\n El aumento de microorganismos resistentes a los agentes antimicrobianos es el principal problema al que se enfrenta la ciencia m\u00e9dica en el tratamiento de las enfermedades infecciosas, efecto que es mayor en los pa\u00edses en v\u00edas de desarrollo. (4, 5, 6, 7, 8, 9)<\/sup><\/p>\n La piel constituye un \u00f3rgano vital para la vida que con sus m\u00faltiples funciones contribuye a asegurar el organismo humano, su vida y salud, y protege del ambiente a todos los \u00f3rganos y aparatos del cuerpo. Su importancia radica no s\u00f3lo en su funci\u00f3n protectora, sino en su complejo trabajo fisiol\u00f3gico. La edad, el sexo, la raza y el clima son factores que modifican el aspecto y su constituci\u00f3n, y la hacen m\u00e1s o menos vulnerable frente a diferentes enfermedades. La piel con todas sus defensas puede ser agredida por numerosos agentes del medio externo e interno, entre ellos las bacterias (10).<\/sup><\/p>\n Las infecciones pi\u00f3genas de la piel (Piodermias) son enfermedades comunes, ocasionadas por Staphylococcus aureus y Streptococcus beta hemol\u00edtico del grupo A, o por la combinaci\u00f3n de ambos, cuyas manifestaciones cl\u00ednicas se expresan en forma de \u00e1reas inflamatorias, asociadas o no a dolor, tumefacci\u00f3n, exudados, ves\u00edculas, costras o ulceraci\u00f3n cut\u00e1nea. (10)<\/sup> El 90% de ellas se deben al Streptococcus beta hemol\u00edtico del grupo A y el 10% al Staphylococcus aureus. (11)<\/sup><\/p>\n En Cuba, la introducci\u00f3n de la Medicina Tradicional comienza en el siglo XV, primero por la colonia espa\u00f1ola y m\u00e1s tarde por africanos, chinos y yucatecas. No es hasta mediados del siglo XX que alcanza su m\u00e1xima expresi\u00f3n con el Doctor Juan Tom\u00e1s Roig, quien identifica 595 especies que eran empleadas por la poblaci\u00f3n cubana para diferentes usos curativos y hace un llamado a la comunidad cient\u00edfica nacional para que se estudien dichas plantas con el objetivo de comprobar su seguridad y eficacia, planteando adem\u00e1s la necesidad de desarrollar la industria farmac\u00e9utica nacional (12)<\/sup><\/p>\n Estudiar y comprender todas las posibles aplicaciones de las plantas medicinales es una tarea gigante acerca de la cual cada d\u00eda se descubre algo nuevo. Sin embargo, hoy ya se sabe lo suficiente para concluir que, cuando son usadas correctamente, las plantas medicinales proveen alternativas para prevenir y tratar numerosas condiciones de salud de forma efectiva y segura. M\u00e1s a\u00fan, existen plantas medicinales y sustancias derivadas de estas que pueden ayudar a optimizar y mejorar diversas funciones de nuestro organismo a\u00fan en el caso de personas que al parecer gozan de buena salud. (14)<\/sup><\/p>\n La flora cubana posee un gran n\u00famero de familias de plantas, que poseen propiedades medicinales reconocidas. (15)<\/sup> Entre estas especies se encuentran las plantas de la familia Turneraceae que han sido utilizadas en busca de alternativas naturales para tratar algunas enfermedades. S\u00f3lo pocos art\u00edculos han sido publicados enfocando actividades farmacol\u00f3gicas del g\u00e9nero Turnera. Algunas especies de Turnera son ampliamente usadas en remedios caseros para diferentes enfermedades inflamatorias.<\/p>\n Espec\u00edficamente la Turnera ulmifolia L ha sido ampliamente utilizada en la cura de las diferentes afecciones antes mencionadas, pero se sabe que, los productos naturales de Turnera ulmifolia L o de cualquier planta del g\u00e9nero Turnera se emplean para potenciar el efecto de una droga, principalmente los antibi\u00f3ticos (como aminogluc\u00f3sidos) frente a cepas de Staphylococcus resistente a meticilina (MRSA) y Escherichia coli (16),<\/sup> pero no han sido reportados en humano o animales su efecto antibacteriano como tal frente a estos dos g\u00e9rmenes pat\u00f3genos.<\/p>\n Teniendo en cuenta los diversos usos medicinales que han sido descritos para esta planta y el aumento de la incidencia de cepas resistentes a los antibi\u00f3ticos en uso, es de inter\u00e9s el estudio de la actividad antibacteriana in vitro de sus extractos con el fin de emplearlos en el tratamiento alternativo de las bacterias productoras de piodermitis. Por todo lo antes expuesto nos hemos <\/p>\n <\/p>\n propuesto determinar la actividad antibacteriana de los extractos secos de las tinturas al 20% de ra\u00edces y flores obtenidos de Turnera ulmifolia L frente a Staphylococcus aureus ATCC 33862 y Streptococcus beta hemol\u00edtico del grupo A ATCC 23941.<\/p>\n Metodolog\u00eda<\/b><\/p>\n Para este trabajo se emplearon 2 cepas bacterianas:<\/p>\n A partir de un crecimiento puro, se prepar\u00f3 una suspensi\u00f3n bacteriana a una concentraci\u00f3n de 1.5 x 108 <\/sup>UFC\/mL utilizando el m\u00e9todo turbidim\u00e9trico de comparaci\u00f3n de Mac Farland (0.5).<\/p>\n Los extractos a probar fueron obtenidos a partir de las tinturas al 20% de ra\u00edces y flores de Turnera ulmifolia L disueltos en dimetilformamida. Las concentraciones m\u00e1ximas de cada uno calculados sobre la base de peso seco de productos solubles totales fueron de 0.4 mg\/mL.<\/p>\n Evaluaci\u00f3n de la actividad antibacteriana: <\/b><\/p>\n La evaluaci\u00f3n de la actividad antibacteriana de los extractos se efectu\u00f3 en 3 etapas.<\/p>\n La primera etapa (Tamizaje General) consisti\u00f3 en una prueba cualitativa para determinar la presencia de actividad antimicrobiana en los productos y las cepas susceptibles a ellas. Para ello se emple\u00f3 el m\u00e9todo de difusi\u00f3n radial en medio agarizado de Grove y Randall descrito en 1955 (17) <\/sup>modificado. Para esta investigaci\u00f3n se tom\u00f3 un tubo con 15 mL de medio de cultivo fundido, agar nutriente para la cepa de Staphylococcus aureus ATCC 33862 y agar sangre de carnero para el Streptococcus beta hemol\u00edtico del grupo A, ATCC 23491 y se le a\u00f1adi\u00f3 1 mL del in\u00f3culo bacteriano, se homogeniz\u00f3 y se vertieron en placas Petri (Alumbra, China) de 90 mm de di\u00e1metro, con un espesor de 3-4 mm del medio de cultivo (BioCen, Cuba) (pH 7,3 \u00b1 0,2).<\/p>\n Posteriormente a la solidificaci\u00f3n con un orador de metal est\u00e9ril se hicieron cortes cil\u00edndricos de 3 mm de di\u00e1metros cada uno, los cuales se colocaron a una distancia no menor de 10 mm del borde de la placa y una separaci\u00f3n entre ellos no menor de 30 mm para evitar la superposici\u00f3n de los halos de inhibici\u00f3n. Los extractos secos se adicionaron con una pipeta semiautom\u00e1tica de Ependorf (10 microlitros por pocillo). Se realizaron 3 determinaciones por cepas y se coloc\u00f3 un control con dimetilformamida como control negativo y como control positivo y de calidad se utiliz\u00f3 un disco de antibi\u00f3tico comercial de amplio espectro para cepas bacterianas, la ciprofloxacina (CIP 5) con una marca Liofilchem, Italia y una concentraci\u00f3n de 5 \u00b5g \/Disco.<\/p>\n Despu\u00e9s de terminada esta etapa, se prosigui\u00f3 a una segunda para determinar la Concentraci\u00f3n M\u00ednima Inhibitoria (CMI) de los productos. Para ello se emple\u00f3 el mismo m\u00e9todo descrito anteriormente, utilizando diluciones seriadas del mismo.<\/p>\n Seguidamente pasamos a la tercera etapa que consisti\u00f3 en la determinaci\u00f3n de la Concentraci\u00f3n M\u00ednima Bactericida (CMB). En esta determinaci\u00f3n se emple\u00f3 el m\u00e9todo de diluciones dobles seriadas en medio l\u00edquido con pases a medios agarizados a las 24 horas de incubaci\u00f3n. (18) <\/sup><\/p>\n Resultados y Discusi\u00f3n<\/b><\/p>\n La Tabla 1 resume los resultados obtenidos en la evaluaci\u00f3n \u00a8in vitro\u00a8 de la actividad antibacteriana de la especie, evidenci\u00e1ndose en las dos partes de la planta, frente a las cepas en estudios, destac\u00e1ndose los halos de inhibici\u00f3n proveniente de las flores en las dos cepas bacterianas, esto puede deberse, a que \u00e9ste, es el \u00f3rgano de la planta en donde mayor actividad metab\u00f3lica debe existir por el proceso de fotos\u00edntesis que realiza y donde est\u00e1n los \u00f3rganos de reproducci\u00f3n, por lo tanto, mayor formaci\u00f3n de metabolitos secundarios. El resultado obtenido fue a trav\u00e9s del c\u00e1lculo de la media para hallar su valor promedio.<\/p>\n Tabla # 1<\/b> Resultados del tamizaje de los extractos secos obtenidos a partir de las tinturas al 20% de las ra\u00edces y flores de la Turnera ulmifolia L.<\/p>\n Ver: Actividad antibacteriana de los extractos secos de Turnera ulmifolia L frente a bacterias productoras de piodermitis<\/b> \u2013 Anexos, al final del art\u00edculo<\/b><\/b><\/p>\n Leyenda: (-) No hubo inhibici\u00f3n del crecimiento bacteriano.<\/p>\n Estos resultados, conjuntamente con la ausencia de halo de inhibici\u00f3n para la Dimetilformamida (control negativo), sugieren que las ra\u00edces y flores de la Turnera ulmifolia L presentan metabolitos secundarios fundamentalmente con actividad antiestafiloc\u00f3cica y antiestreptoc\u00f3cica los cuales son solubles en Dimetilformamida. Se utiliz\u00f3 el control con Dimetilformamida porque se plantea que no tiene actividad antibacteriana, (19)<\/sup> corrobor\u00e1ndose en nuestro trabajo, al encontrarnos ausencia del halo de inhibici\u00f3n en dicho control.<\/p>\n Al comparar la bioactividad de los extractos y la Ciprofloxacina (control positivo) antibi\u00f3tico comercial, se pudo demostrar que los halos de inhibici\u00f3n son mayores en esta \u00faltima. La diferencia en el di\u00e1metro de los halos podr\u00eda atribuirse a la baja concentraci\u00f3n de los constituyentes qu\u00edmicos presentes en el extracto vegetal con actividad antibacteriana. Pero losresultados no son desalentadores,por cuanto hay que tener en cuenta la diferencia de las concentraciones de los principios activos entre los discos de antibi\u00f3ticos comerciales y los que contienen los extractos vegetales de las ra\u00edces y flores de Turnera ulmifolia L.<\/p>\n En este sentido los discos comerciales de antibi\u00f3ticos contienen el principio activo con altos niveles de pureza, en tanto, los extractos vegetales presentan concentraciones en las que pueden variar las cantidades de metabolitos secundario presentes en ellos. Si se comparan estos resultados con los obtenidos en otras investigaciones donde se utilizan plantas para enfrentar bacterias causantes de enfermedades d\u00e9rmicas se puede decir que son similares en cuanto a los halos de inhibici\u00f3n obtenidos manifestando una acci\u00f3n limitante en el crecimiento de la bacteria en forma evidente. En este sentido investigaciones similares fueron realizada por Vengoa<\/strong> et al (2000) (20)<\/sup> los cuales realizaron un amplio estudio sobre la actividad antibacteriana in vitro en cepas de Staphylococcus aureus y Streptococcus sp<\/strong> donde muestran resultados similares a los obtenidos en este trabajo, empleando concentraciones alrededor de los 400 \u00b5g\/disco.<\/p>\n Otros resultados se obtuvieron por Mothana et al (2009) (21)<\/sup>, trabajando con 26 especies de plantas pertenecientes a 17 familias bot\u00e1nicas diferentes, en los cuales se realizaron extracciones con metanol, los resultados arrojaron que 23 de estas plantas mostraron actividad antiestafiloc\u00f3cica empleando concentraciones 8 veces mayor a la empleada en <\/p>\n <\/p>\n esta investigaci\u00f3n.<\/p>\n As\u00ed mismo, en un amplio estudio realizado por Duraipandiyan et al (2006) (22)<\/sup> en la India con 18 especies de plantas medicinales obtuvieron resultados similares a los obtenidos en este trabajo pero emplearon concentraci\u00f3n de 2,5 mg\/discos, lo que representa una concentraci\u00f3n 4 veces mayor que la m\u00ednima concentraci\u00f3n utilizada en el presente estudio en el cual se observ\u00f3 la actividad antiestafiloc\u00f3cica, resultando mejores los resultados alcanzados en la presente investigaci\u00f3n.<\/p>\n Es bueno se\u00f1alar que el m\u00e9todo empleado por estos autores fue el difusi\u00f3n radial con discos de papel, impregnados con el extracto, el cual se recomienda solo para determinaciones cualitativas, ya que retiene una parte del compuesto embebido en la celulosa del disco, por lo que las concentraciones difundidas en el agar son siempre menores que las aplicadas en el soporte de papel y las concentraciones activas reportadas son mayores que las que realmente requiere el microorganismo.<\/p>\n Por otra parte Silva y colaboradores (2007) (23) <\/sup>reportan halos de inhibici\u00f3n muy similares para Staphylococcus aureus a los presentados aqu\u00ed, usando el mismo m\u00e9todo de difusi\u00f3n radial en medio agarizado pero con mayores concentraciones (0.68mg\/mL) de extractos hidroalcoh\u00f3licos de Rubus urticaefolios Estos investigadores no obtuvieron halos de inhibici\u00f3n para Streptococos beta hemol\u00edticos del grupo A a\u00fan usando concentraciones m\u00e1s altas de extracto vegetal. Por lo que se puede destacar que los resultados alcanzados en la presente investigaci\u00f3n son muy promisorios, pues a concentraciones tan bajas como 0.4 mg\/pocillo se obtienen halos de inhibici\u00f3n del crecimiento frente a Staphylococcus aureus ATCC 33862 y Streptococos beta hemol\u00edticos del grupo A ATCC 23491.<\/p>\n En la Tabla # 2 se pueden observar los valores medios de la actividad bacteriost\u00e1tica de los extractos en estudio frente a la cepa Streptococcus beta hemol\u00edtico del grupo A, ATCC 23491, pudi\u00e9ndose constatar que el extracto proveniente de las flores mostr\u00f3 mayor poder inhibitorio, al inhibirme el crecimiento con una concentraci\u00f3n m\u00ednima hasta 0.05 mg\/mL, obteni\u00e9ndose un halo de inhibici\u00f3n de 4 mm de di\u00e1metro, y en las ra\u00edces fue en la concentraci\u00f3n hasta 0.1mg\/mL con igual halo de inhibici\u00f3n.<\/p>\n Tabla # 2<\/b> Resultados de la actividad inhibitoria de los extractos secos obtenidos a partir de las tinturas al 20% de las ra\u00edces y flores de la Turnera ulmifolia frente a Streptococcus beta hemol\u00edtico del grupo A ATCC 23491<\/p>\n Ver: Actividad antibacteriana de los extractos secos de Turnera ulmifolia L frente a bacterias productoras de piodermitis <\/b>\u2013 Anexos, al final del art\u00edculo<\/b><\/b><\/p>\n Leyenda: (-) No hubo inhibici\u00f3n del crecimiento bacteriano.<\/p>\n En la Tabla # 3 se muestran los resultados de la actividad inhibitoria de los extractos frente a la cepa de Staphylococcus aureus ATCC 33862, encontr\u00e1ndose la Concentraci\u00f3n M\u00ednima Inhibitoria (CMI) en 0.1 mg\/mL para los extractos provenientes de las flores y ra\u00edces con un di\u00e1metro de 5 mm y 4 mm respectivamente.<\/p>\n Tabla # 3<\/b> Resultados de la actividad inhibitoria de los extractos secos obtenidos a partir de las tinturas al 20% de las ra\u00edces y flores de la Turnera ulmifolia L frente a Staphylococcus aureus ATCC 33862<\/p>\n Ver: Actividad antibacteriana de los extractos secos de Turnera ulmifolia L frente a bacterias productoras de piodermitis <\/b>\u2013 Anexos, al final del art\u00edculo<\/b><\/b><\/p>\n Leyenda: (-) No hubo inhibici\u00f3n del crecimiento bacteriano.<\/p>\n En cuanto a la concentraci\u00f3n de 0.025mg\/mL de los extractos empleados, no se encontr\u00f3 actividad inhibitoria frente a las cepas en estudio, esto puede estar dado porque al disminuir las concentraciones, los metabolitos se encuentran m\u00e1s disueltos disminuyendo as\u00ed su concentraci\u00f3n, y por ende, su efecto terap\u00e9utico es menor, esto sugiere una tendencia a la dosis dependencia. Se puede inferir que la actividad antibacteriana ha aumentado con la pureza del principio activo. Estos resultados est\u00e1n en concordancia con reportes en la bibliograf\u00eda que plantean la existencia de una relaci\u00f3n directa entre el nivel de pureza y el aumento de la actividad biol\u00f3gica. (22) <\/sup><\/p>\n Se ha encontrado en la literatura revisada otras investigaciones donde se determina Concentraci\u00f3n M\u00ednima Inhibitoria (CMI) por el m\u00e9todo de difusi\u00f3n radial en medio agarizado. As\u00ed por ejemplo Avellaneda y colaboradores (2007) (23) <\/sup>determinaron la CMI para extractos hidroalcoh\u00f3licos de Diphisa minutifolia Rose contra varias bacterias pat\u00f3genas, entre ellas Staphylococcus aureus teniendo como resultado una Concentraci\u00f3n M\u00ednima Inhibitoria (CMI) de 50mg\/mL, mayor a la obtenida en la presente investigaci\u00f3n. Por lo que los extractos de Turnera ulmifolia L poseen una gran potencialidad como bacteriost\u00e1ticos.<\/p>\n En esta etapa se utiliz\u00f3 el m\u00e9todo de difusi\u00f3n radial en medio agarizado, que es uno de los m\u00e9todos m\u00e1s usado en investigaciones para determinar la actividad antimicrobiana frente a extractos naturales. Tiene como ventaja el uso de peque\u00f1as cantidades de muestras, adem\u00e1s de la posibilidad de probar varios compuestos contra un mismo microorganismo pero las concentraciones ensayadas difieren considerablemente entre ellas.<\/p>\n En la Tabla # 4 se muestran los resultados de la actividad bactericida de los extractos provenientes de las ra\u00edces y flores, observ\u00e1ndose que la CMB de ambos productos estuvo a la concentraci\u00f3n de 0.05 mg\/mL frente a Streptococcus beta hemol\u00edtico del grupo A, ATCC 23491 y Staphylococcus aureus ATCC 33862.<\/p>\n Tabla # 4<\/b> Resultados de la actividad bactericida de los extractos secos obtenidos a partir las tinturas al 20% de las ra\u00edces y flores de la Turnera ulmifolia L.<\/p>\n Ver: Actividad antibacteriana de los extractos secos de Turnera ulmifolia L frente a bacterias productoras de piodermitis <\/b>\u2013 Anexos, al final del art\u00edculo<\/b><\/b><\/p>\n Leyenda: (*) Concentraci\u00f3n a la cual el producto elimina el crecimiento bacteriano.<\/p>\n Los microorganismos estudiados en el presente trabajo fueron bacterias grampositivas. Las mismas poseen una membrana citoplasm\u00e1tica con fosfol\u00edpidos y prote\u00ednas, por fuera de esta se encuentra la pared celular que est\u00e1 compuesta por una amplia capa de peptidoglucano y bajas concentraciones de l\u00edpidos (1- 4%); estas caracter\u00edsticas la hacen muy permeable a los compuestos polares. Se ha descrito que los extractos de Turnera ulmifolia L presentan una gran variedad de metabolitos secundarios con actividad antibacteriana, (24)<\/sup> entre ellos taninos y flavonoides, los cuales son compuestos polares que podr\u00edan atravesar f\u00e1cilmente la membrana y causar un desbalance electrol\u00edtico, ocasion\u00e1ndole la <\/p>\n <\/p>\n muerte.<\/p>\n Es v\u00e1lido destacar que usualmente la concentraci\u00f3n requerida de un producto para lograr un efecto letal, es mayor que para producir un efecto inhibitorio, por lo que es usual que los valores de CMB deben dar superiores a los valores de Concentraci\u00f3n M\u00ednima Inhibitoria (CMI), pero en nuestro caso ocurri\u00f3 todo lo contrario. Esto se debe probablemente a que fueron dos m\u00e9todos completamente diferentes.<\/p>\n Para la determinaci\u00f3n de la Concentraci\u00f3n M\u00ednima Inhibitoria (CMI) se utiliz\u00f3 el m\u00e9todo de difusi\u00f3n radial en medio agarizado, en el cual el producto debe difundir por las mol\u00e9culas que forman la malla solidificante en el agar y esto se hace dif\u00edcil para el mismo cuando son mol\u00e9culas grandes. No se utiliz\u00f3 el m\u00e9todo de diluciones dobles seriadas en medio l\u00edquido para la determinaci\u00f3n de la Concentraci\u00f3n M\u00ednima Inhibitoria (CMI), ya que los estudios son fuertemente pigmentados y esto impide detectar el crecimiento bacteriano, dificultado as\u00ed la lectura de los resultados. Por estas razones fue necesario emplear diferentes m\u00e9todos para la determinaci\u00f3n de la Concentraci\u00f3n M\u00ednima Inhibitoria (CMI) y CMB.<\/p>\n Actividad antibacteriana de los extractos secos de Turnera ulmifolia L frente a bacterias productoras de piodermitis \u2013 Anexos<\/b><\/p>\n\n