{"id":48568,"date":"2018-02-18T07:38:42","date_gmt":"2018-02-18T06:38:42","guid":{"rendered":"https:\/\/www.revista-portalesmedicos.com\/revista-medica\/?p=48568"},"modified":"2018-02-18T07:38:42","modified_gmt":"2018-02-18T06:38:42","slug":"recogida-transporte-procesamiento-muestras-analisis-microbiologico-ocular","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.revista-portalesmedicos.com\/revista-medica\/recogida-transporte-procesamiento-muestras-analisis-microbiologico-ocular\/","title":{"rendered":"Recogida, transporte y procesamiento de muestras para an\u00e1lisis microbiol\u00f3gico ocular"},"content":{"rendered":"<h2 style=\"text-align: center;\"><strong>Recogida, transporte y procesamiento de muestras para an\u00e1lisis microbiol\u00f3gico ocular<\/strong><\/h2>\n<p><strong><u>Resumen:<\/u><\/strong><\/p>\n<p>El m\u00e9todo de recogida de material biol\u00f3gico ocular depende de la estructura o secreci\u00f3n a la que se quiera acceder para su estudio. En caso de estructuras superficiales, se deber\u00e1 recoger la muestra sin alterarla previamente con tratamientos o colirios t\u00f3picos y m\u00ednimamente durante los m\u00e9todos de recogida. No deben admitirse muestras si han transcurrido m\u00e1s de 24 horas de la toma y sin medio de transporte. Las instrucciones de recogida de muestras oculares que se muestran en este art\u00edculo son una recopilaci\u00f3n de las recomendadas por la Sociedad Espa\u00f1ola de Enfermedades Infecciosas y Microbiolog\u00eda Cl\u00ednica (SEIMC).<\/p>\n<p><!--more--><\/p>\n<p>Blasco-Mart\u00ednez, Alejandro<sup>1<\/sup>; Del Prado-Sanz, Eduardo<sup>2<\/sup>; Cameo-Gracia, Beatriz<sup>1<\/sup>; Soriano-Pina, Diana<sup>1<\/sup>; P\u00e9rez-Velilla, Javier<sup>1<\/sup>; Clemente-Urraca, Sara<sup>1<\/sup>; Mateo-Orobia, Antonio<sup>3<\/sup><\/p>\n<p>1: Graduado \u00d3ptico-Optometrista. Universidad de Zaragoza<\/p>\n<p>2: FEA Oftalmolog\u00eda. HU Royo Villanova. Zaragoza<\/p>\n<p>3: FEA Oftalmolog\u00eda. HU Miguel Servet. Zaragoza<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<p><strong><u>Palabras clave:<\/u><\/strong><\/p>\n<p>Microbiolog\u00eda; microorganismos; SEIMC; muestras oculares; instrucciones; infecci\u00f3n<\/p>\n<p><strong>1) Exudado conjuntival<\/strong><\/p>\n<p><strong>Recogida: <\/strong>Durante la toma de la muestra ha de evitarse el contacto con el borde del p\u00e1rpado para no arrastrar la microbiota colonizante. Si se sospecha infecci\u00f3n por <em>Chlamydia<\/em> hay que tomar una torunda adicional y colocar la muestra en el medio de transporte espec\u00edfico que utilice el laboratorio. Del mismo modo en caso de infecci\u00f3n v\u00edrica la muestra debe introducirse en un medio de transporte adecuado para virus.<\/p>\n<p>Se frota la conjuntiva tarsal con un <em>hisopo de Dacr\u00f3n<\/em> o <em>Alginato <\/em>conservado en medio de transporte de <em>Amies<\/em>. Si la mucosa est\u00e1 seca, empapar la torunda en caldo <em>triptona-soja<\/em> <em>(TSB)<\/em> o en caldo <em>infusi\u00f3n cerebro-coraz\u00f3n (BHI)<\/em> antes de tomar la muestra. Adem\u00e1s, debe obtenerse una segunda muestra sin medio de transporte para poder efectuar un examen microsc\u00f3pico.<\/p>\n<p><strong>Transporte:<\/strong> En general, se recomienda la utilizaci\u00f3n del <em>medio de Amies<\/em> para el transporte de una muestra de exudados, y conservar entre 4 y 8\u00baC hasta su procesamiento en laboratorio.<\/p>\n<p><strong>Procesamiento:<\/strong> La muestra se inocula directamente en medios s\u00f3lidos reaislando al menos en tres estr\u00edas para poder estimar la cantidad de crecimiento. Si se ha empleado un caldo como medio de transporte, \u00e9ste debe homogeneizarse agit\u00e1ndolo antes de inocularlo en medios s\u00f3lidos.<sup>1, 2<\/sup><\/p>\n<p><strong>2) Raspado corneal<\/strong><\/p>\n<p>La presencia bacteriana en los raspados puede variar entre 100 a 300 Unidades Formadoras de Colonias (UFC) en una muestra entre 1 y 3\u03bcL, lo que quiere decir que es tan baja que se ve afectada significativamente por la presencia de antibi\u00f3ticos t\u00f3picos, reduciendo la sensibilidad del cultivo en un 30-40%.<\/p>\n<p><strong>Recogida:<\/strong> No existe consenso sobre el instrumento o el procedimiento a seguir para la toma de muestra, pero se pueden utilizar, anestesiando previamente la lesi\u00f3n, <em>esp\u00e1tulas de Kimura<\/em>, <em>hoja Bard-Parker<\/em>, hojas de bistur\u00ed por el extremo no cortante, agujas est\u00e9riles o escobillones empapados en <em>caldo tioglicolato<\/em>. Se debe raspar tanto el fondo de la \u00falcera como los bordes.<\/p>\n<p><strong>Transporte:<\/strong> Tradicionalmente, el raspado corneal se sembraba directamente en medios s\u00f3lidos en la misma consulta del oftalm\u00f3logo, pero esta pr\u00e1ctica presenta varios inconvenientes por lo que se recomienda transportarla al laboratorio para su procesamiento. Para ello, se puede utilizar un <em>medio de Amies<\/em>,<em> BHI<\/em> o <em>TSB<\/em>.<\/p>\n<p><strong>Procesamiento:<\/strong> Para cualquier muestra corneal, debe emplearse un caldo de enriquecimiento <em>TSB<\/em>, <em>BHI<\/em> o <em>tioglicolato<\/em> antes de inocularla en medios s\u00f3lidos.<sup>1, 2<\/sup><\/p>\n<p><strong>3) Biopsia corneal<\/strong><\/p>\n<p>La toma de una biopsia corneal est\u00e1 indicada en los siguientes casos:<\/p>\n<ul>\n<li>La infecci\u00f3n corneal no responde al tratamiento.<\/li>\n<li>Los cultivos de los raspados han sido negativos y contin\u00faa la sospecha cl\u00ednica de queratitis infecciosa.<\/li>\n<li>La infecci\u00f3n se localiza en las capas profundas del estroma inaccesibles al raspado.<\/li>\n<\/ul>\n<p><strong>Recogida:<\/strong> La biopsia puede realizarse con el microscopio quir\u00fargico con una hoja peque\u00f1a, utilizando tr\u00e9panos de 2-3 mm de di\u00e1metro. Se lleva a cabo trepanaci\u00f3n no penetrante y con ayuda de un cuchillete o esp\u00e1tula se finaliza la queratectom\u00eda parcial. Tambi\u00e9n se ha utilizado l\u00e1ser para realizar queratectom\u00edas superficiales.<\/p>\n<p><strong>Transporte:<\/strong> Se deben remitir al laboratorio de forma urgente en contenedor est\u00e9ril con una peque\u00f1a cantidad de soluci\u00f3n salina o en caldo <em>BHI<\/em>, <em>TSB<\/em> o de <em>tioglicolato<\/em>.<\/p>\n<p><strong>Procesamiento: <\/strong>El recomendado para cualquier muestra corneal, descrito en el punto anterior.<sup>1, 2<\/sup><\/p>\n<p><strong>4) Lente de Contacto<\/strong><\/p>\n<p><strong>Recogida:<\/strong> El porta-lentes de contacto es el elemento m\u00e1s frecuentemente contaminado. Se puede cultivar el porta-lentes, la propia lente de contacto, los fluidos adheridos a ella resultantes de su uso o los l\u00edquidos de conservaci\u00f3n que han estado en contacto con la lente o el estuche. Tiene utilidad en los casos de sospecha de infecci\u00f3n bacteriana o por <em>Acanthamoeba spp.<\/em><\/p>\n<p><strong>Transporte:<\/strong> El medio de transporte y cultivo puede ser o tubos con <em>soluci\u00f3n salina de Page<\/em> o <em>agar no nutriente<\/em> con una cepa de <em>E. coli<\/em>. Si no se dispone de estos medios, se debe remitir al laboratorio de forma urgente en contenedor est\u00e9ril con una peque\u00f1a cantidad de soluci\u00f3n salina.<\/p>\n<p><strong>Procesamiento:<\/strong> Se raspa con la hoja de un bistur\u00ed por la cara c\u00f3ncava y se inocula en medio s\u00f3lido.<sup>1, 2, 3, 4<\/sup><\/p>\n<p><strong>5) Humor acuoso y Humor v\u00edtreo<\/strong><\/p>\n<p>La toma de muestras de ambos fluidos tiene sentido en casos de sospecha de endoftalmitis o vitritis.<\/p>\n<p><strong>Recogida:<\/strong> Las muestras de humor acuoso pueden obtenerse por punci\u00f3n y aspiraci\u00f3n. Para las muestras de humor v\u00edtreo se recomienda la vitrectom\u00eda por pars plana y lavado para evitar tracciones v\u00edtreas. Las gu\u00edas actuales la recomiendan no solo en casos avanzados de endoftalmitis, sino tambi\u00e9n en agudos, ya que permite obtener una mayor cantidad de muestra, reduce la carga microbiana del v\u00edtreo (y por tanto la inflamaci\u00f3n) y adem\u00e1s disminuye la probabilidad de reintervenci\u00f3n.<sup>5<\/sup><\/p>\n<p><strong>Transporte: <\/strong>Deben remitirse de forma urgente al laboratorio en contenedor est\u00e9ril o en viales de hemocultivo pedi\u00e1tricos, ya que se trata de muestras con escaso volumen.<\/p>\n<p><strong>Procesamiento:<\/strong> La muestra de humor v\u00edtreo debe concentrarse mediante filtraci\u00f3n con filtros est\u00e9riles de polivinilo o mediante centrifugaci\u00f3n. Cultivar inoculando en medio s\u00f3lido a\u00f1adiendo caldo de enriquecimiento <em>TSB<\/em>, <em>BHI<\/em> o <em>tioglicolato<\/em>.<sup>1, 2<\/sup><\/p>\n<p><strong>6) Lente intraocular<\/strong><\/p>\n<p><strong>Recogida:<\/strong> Tambi\u00e9n en casos de endoftalmitis post-quir\u00fargica, se puede cultivar la lente intraocular completa o fragmentos capsulares.<\/p>\n<p><strong>Transporte: <\/strong>Una vez extra\u00edda la lente se introduce en 0,5ml de soluci\u00f3n salina est\u00e9ril o en caldo <em>BHI<\/em>, <em>TSB<\/em> o de <em>tioglicolato<\/em> y se remite de forma urgente al laboratorio.<sup>5<\/sup><\/p>\n<p><strong>Procesamiento:<\/strong> La lente debe agitarse vigorosamente durante al menos 10 minutos en la soluci\u00f3n salina de transporte para permitir el desprendimiento de c\u00e9lulas.<sup>1, 2<\/sup><\/p>\n<p><strong>7) Exudado palpebral<\/strong><\/p>\n<p><strong>Recogida:<\/strong> Se frota el borde del p\u00e1rpado o de la zona ulcerada con una torunda de algod\u00f3n, <em>Dacr\u00f3n<\/em> o <em>Alginato<\/em> previamente humedecida en <em>caldo TSB<\/em> o <em>BHI<\/em>.<\/p>\n<p><strong>Transporte:<\/strong> Se recomienda la utilizaci\u00f3n del <em>medio de Amies<\/em> para el transporte de una muestra de exudados y conservar entre 4 y 8\u00baC hasta su procesamiento en laboratorio, como se ha comentado anteriormente.<\/p>\n<p><strong>Procesamiento: <\/strong>Mismo procedimiento que para los exudados conjuntivales.<sup>1, 2<\/sup><\/p>\n<p><strong>8) Muestras del aparato lagrimal<\/strong><\/p>\n<p><strong>Recogida:<\/strong> Aspirar el exudado purulento procedente del canal o del saco lagrimal con una jeringa. Tambi\u00e9n se puede aspirar y cultivar el material obtenido durante una dacriocistotom\u00eda o canaliculotom\u00eda.<\/p>\n<p>Si hay concreciones en el canal lagrimal, se deben extraer con una esp\u00e1tula o cureta y extender en un portaobjetos para su posterior tinci\u00f3n.<\/p>\n<p><strong>Transporte:<\/strong> El contenido de la jeringa debe remitirse al laboratorio en contenedores con atm\u00f3sfera reducida para detecci\u00f3n de microorganismos anaerobios.<\/p>\n<p><strong>Procesamiento:<\/strong> Mismo procedimiento que para muestras corneales.<sup>1, 2<\/sup><\/p>\n<p><strong><u>Bibliograf\u00eda:<\/u><\/strong><\/p>\n<ol>\n<li>Etxebarr\u00eda J, L\u00f3pez-Cerero L, Mensa J. Diagn\u00f3stico microbiol\u00f3gico de las infecciones oculares. En: Cercenado E, Cant\u00f3n R, editores [Internet]. Procedimientos en Microbiolog\u00eda Cl\u00ednica: Recomendaciones de la Sociedad Espa\u00f1ola de Enfermedades Infecciosas y Microbiolog\u00eda Cl\u00ednica. 1a ed. Espa\u00f1a: SEIMC;2008.2-14. [citado 15 Jun 2016]. Disponible en:<\/li>\n<\/ol>\n<p>https:\/\/www.seimc.org\/contenidos\/documentoscientificos\/procedimientosmicrobiologia\/seimc-procedimientomicrobiologia31.pdf<\/p>\n<ol start=\"2\">\n<li>L\u00f3pez-Cerero L, Etxebarria J, Mensa J. Diagn\u00f3stico microbiol\u00f3gico de las infecciones oculares. Enfermedades Infecciosas y Microbiolog\u00eda Cl\u00ednica. 2009;27(9):531-535.<\/li>\n<li>Lo J, Fang PC, Chien CC, Hsiao CC, Tseng SL, Lai YH. PCR analysis for assessment of bacterial bioburden in orthokeratology lens cases. Molecular Vision. 2016;22:1-8.<\/li>\n<li>P\u00e9rez-Pomata T, P\u00e9rez-\u00c1lvarez MJ, Rodr\u00edguez-Zurita ME, Moreno-L\u00f3pez M. Queratitis en portador de lentes de contacto. Enfermedades Infecciosas y Microbiolog\u00eda Cl\u00ednica. 2006;24(4):280-282.<\/li>\n<li>Merayo-Lloves J, Riestra AC, Galarreta D, Cordov\u00e9s L, Alfonso JF. Manejo de la endoftalmitis en cirug\u00eda de cataratas. Barcelona: Ediciones Mayo; 2014.<\/li>\n<\/ol>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Recogida, transporte y procesamiento de muestras para an\u00e1lisis microbiol\u00f3gico ocular Resumen: El m\u00e9todo de recogida de material biol\u00f3gico ocular depende de la estructura o secreci\u00f3n a la que se quiera acceder para su estudio. 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