{"id":61174,"date":"2021-03-08T10:20:53","date_gmt":"2021-03-08T09:20:53","guid":{"rendered":"https:\/\/www.revista-portalesmedicos.com\/revista-medica\/?p=61174"},"modified":"2021-03-08T10:20:53","modified_gmt":"2021-03-08T09:20:53","slug":"cultivo-aislamiento-e-identificacion-de-celulas-madre-de-pulpa-dental-una-alternativa-en-medicina-regenerativa","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.revista-portalesmedicos.com\/revista-medica\/cultivo-aislamiento-e-identificacion-de-celulas-madre-de-pulpa-dental-una-alternativa-en-medicina-regenerativa\/","title":{"rendered":"Cultivo, aislamiento e identificaci\u00f3n de c\u00e9lulas madre de pulpa dental: una alternativa en medicina regenerativa"},"content":{"rendered":"

Cultivo, aislamiento e identificaci\u00f3n de c\u00e9lulas madre de pulpa dental: una alternativa en medicina regenerativa<\/strong><\/p>\n

Autor principal: Julio C\u00e9sar Flores Preciado<\/p>\n

Vol. XVI; n\u00ba 5; 209<\/p>\n

Culture, insolation, and identification of dental pulp stem cells: a regenerative medicine alternative<\/strong><\/p>\n

Fecha de recepci\u00f3n: 03\/02\/2021<\/p>\n

Fecha de aceptaci\u00f3n: 04\/03\/2021<\/p>\n

Incluido en Revista Electr\u00f3nica de PortalesMedicos.com Volumen XVI. N\u00famero 5 \u2013\u00a0 Primera quincena de Marzo de 2021 – P\u00e1gina inicial: Vol. XVI; n\u00ba 5; 209\u00a0<\/strong><\/p>\n

Autores: <\/strong><\/p>\n

Julio C\u00e9sar Flores Preciado, Cirujano Dentista, Doctor en Ciencias \u00e1rea biomateriales y biotecnolog\u00eda. Universidad Aut\u00f3noma de Baja California, Facultad de Odontolog\u00eda Mexicali, M\u00e9xico.<\/p>\n

Ra\u00fal Rosales Ib\u00e1\u00f1ez, Aaron R\u00edos Rosas, Especialista en Ortodoncia, Doctor en Ciencia \u00e1rea ingenier\u00eda de tejidos y medicina regenerativa, Universidad Nacional Aut\u00f3noma de M\u00e9xico, M\u00e9xico.<\/p>\n

RESUMEN<\/strong><\/p>\n

En la actualidad la medicina regenerativa e ingenier\u00eda de tejidos establecen una sinergia de inter\u00e9s cient\u00edfico global. La aplicaci\u00f3n terap\u00e9utica de c\u00e9lulas madre de pulpa dental debido a su capacidad de proliferaci\u00f3n e inducci\u00f3n, demuestran su alto potencial regenerativo. Los defectos \u00f3seos derivados de lesiones traum\u00e1ticas o enfermedades degenerativas comprometen las expectativas de recuperaci\u00f3n debido a los tratamientos radicales y a los pobres resultados que \u00e9stos ofrecen. Por tal motivo, \u00e9ste estudio tiene como prop\u00f3sito fundamental el cultivo exitoso de c\u00e9lulas madre y su validaci\u00f3n histoqu\u00edmica, con una visi\u00f3n futura en su caracterizaci\u00f3n e inducci\u00f3n al linaje osteog\u00e9nico para su implementaci\u00f3n en un constructor tisular, formado por las c\u00e9lulas madre, un biopol\u00edmero y un agente inductor necesarios para la configuraci\u00f3n de un sistema tisular. En conclusi\u00f3n, los resultados muestran que a partir de la pulpa dental es posible aislar c\u00e9lulas madre capaces de proliferar, ser identificadas por inmunohistoqu\u00edmica con un alto potencial de organizaci\u00f3n creando un microambiente celular \u00f3ptimo que asegura la regeneraci\u00f3n tisular exitosa, en un menor periodo de tiempo, con mejores resultados y expectativas de recuperaci\u00f3n.<\/p>\n

PALABRAS CLAVE<\/strong><\/p>\n

andamio, c\u00e9lulas madre, constructo tisular, inmunohistoqu\u00edmica, linaje osteog\u00e9nico, medicina regenerativa.<\/p>\n

\n

ABSTRACT<\/strong><\/p>\n

Currently regenerative medicine and tissue engineering establish a synergy of global scientific interest. Therapeutic application of dental pulp stem cells due to their proliferation and induction capabilities demonstrates their high regenerative potential. Bone defects arising from traumatic injuries or degenerative diseases compromise recovery expectations due to radical treatments and the poor results they offer. For this reason, the fundamental purpose of this study is the successful cultivation of stem cells of dental pulp and its immunohistochemical validation, with a future vision in its characterization and cellular induction to the osteogenic lineage, for its implementation in a tissue construct: formed by stem cells, a biopolymer and an inducing agent for cell implantation and proliferation, necessary in the configuration of the tissue system. In conclusion, the results show that from dental pulp it is possible to isolate stem cells capable of proliferating, be identified by immunohistochemistry with a high potential for differentiation and organization in a scaffold can be implanted in an area of bone injury, thus it is possible to produce successful tissue regeneration, in a shorter period, with better results and recovery expectations.<\/p>\n

KEYWORDS<\/strong><\/p>\n

scaffold, stem cell, tissular construct, immunohistochemical, osteogenic lineage, regenerative medicine.<\/p>\n

\n

Los autores de este manuscrito declaran que:<\/p>\n

Todos ellos han participado en su elaboraci\u00f3n y no tienen conflicto de intereses.<\/p>\n

La investigaci\u00f3n se ha realizado siguiendo las Pautas \u00e9ticas internacionales para la investigaci\u00f3n relacionada con la salud con seres humanos elaboradas por el Consejo de Organizaciones Internacionales de las Ciencias M\u00e9dicas (CIOMS) en colaboraci\u00f3n con la Organizaci\u00f3n Mundial de la Salud (OMS) https:\/\/cioms.ch\/publications\/product\/pautas-eticas-internacionales-para-la-investigacion-relacionada-con-la-salud-con-seres-humanos\/<\/p>\n

El manuscrito es original y no contiene plagio.<\/p>\n

El manuscrito no ha sido publicado en ning\u00fan medio y no est\u00e1 en proceso de revisi\u00f3n en otra revista.<\/p>\n

Han obtenido los permisos necesarios para las im\u00e1genes y gr\u00e1ficos utilizados.<\/p>\n

Han preservado las identidades de los pacientes.<\/p>\n

INTRODUCCI\u00d3N<\/strong><\/p>\n

Una c\u00e9lula madre es una c\u00e9lula formadora, no especializada, con la capacidad de auto renovarse1<\/sup> mediante divisi\u00f3n celular, seguida de una etapa de diferenciaci\u00f3n espec\u00edfica de forma aut\u00f3noma o inducida, para finalmente originar c\u00e9lulas de uno o m\u00e1s tejidos espec\u00edficas, diferenciadas, maduras y funcionales, por lo cual, son consideradas como c\u00e9lulas gen\u00e9ricas capaces de hacer copias exactas de s\u00ed mismas de forma indefinida.<\/p>\n

Las investigaciones recientes sobre c\u00e9lulas madre resaltan el gran potencial que tienen para la regeneraci\u00f3n de tejidos in vitro<\/em> e in situ<\/em>, abri\u00e9ndose con ello, un amplio panorama en su aplicaci\u00f3n terap\u00e9utica en \u00e1reas de las ciencias de la salud (medicina regenerativa) y bioingenier\u00eda (ingenier\u00eda de tejidos y biomateriales).<\/p>\n

La medicina regenerativa, disciplina del \u00e1rea m\u00e9dica dirige investigaciones actuales al estudio sobre c\u00e9lulas madre y su potencial de diferenciaci\u00f3n en c\u00e9lulas de diferentes tejidos2<\/sup>.\u00a0 Estos estudios se basan en la terapia celular, la administraci\u00f3n de complejos celulares e inductores3<\/sup>, matrices biol\u00f3gicas o biomateriales y protocolos dise\u00f1ados mediante la interdisciplina con otras ciencias como la ingenier\u00eda de tejidos.<\/p>\n

A.\u00a0\u00a0\u00a0 Antecedentes de estudio de las c\u00e9lulas madre.<\/p>\n

Para inicios de 1970, con las nuevas t\u00e9cnicas de trasplantes e investigaciones sobre el uso de materiales y aparatos biocompatibles, se establece un nuevo campo de estudio interdisciplinario llamado ingenier\u00eda tisular. A mediados de 1980, las investigaciones centraban su inter\u00e9s de estudio a una familia de c\u00e9lulas muy prometedoras, las c\u00e9lulas madre mesenquimales (CMM) adultas con cualidades de inter\u00e9s, de las que destacaban su capacidad de autorenovaci\u00f3n y su divisi\u00f3n pluripotencial4<\/sup>.<\/p>\n

En 1988 en los Estados Unidos, cient\u00edficos de la Universidad de Wisconsin, obtienen por primera vez c\u00e9lulas madre embrionarias humanas de cord\u00f3n umbilical, cuyo auge radica, debido a que a finales de 1998 se da a conocer que las mismas, hab\u00edan sido cultivadas con \u00e9xito, obteniendo hueso, m\u00fasculo, piel y otros tejidos.<\/p>\n

En el a\u00f1o 2000, inicialmente con el aislamiento de las c\u00e9lulas madre adultas de pulpa dental (DPSCs) de terceros molares, seguido en el\u00a0 2003 por las c\u00e9lulas madre de dientes exfoliados deciduos (SHEDs), posteriormente un amplio semillero de c\u00e9lulas madre adultas, las c\u00e9lulas madre de papila apical (SCAPs), las c\u00e9lulas madre de ligamento periodontal (PDLSCs), las c\u00e9lulas madre de fol\u00edculo dental (DFPCs) y finalmente con el descubrimiento de las c\u00e9lulas madre de rugas palatinas5,6,7 <\/sup>se abre un abanico\u00a0 en el cultivo, asilamiento y diferenciaci\u00f3n de c\u00e9lulas madre adultas no embrionarias; desde entonces, las poblaciones celulares de cavidad oral, constituyen una exclusiva familia de c\u00e9lulas muy prometedoras en la terapia regenerativa<\/p>\n

B.\u00a0\u00a0\u00a0 \u00a0\u00a0 C\u00e9lulas madre dentales y su potencial uso terap\u00e9utico.<\/p>\n

La ingenier\u00eda de tejidos\u00a0 combina el uso de c\u00e9lulas madre de cavidad oral (DSCs) debido al acceso f\u00e1cil, no invasivo y la prometedora gama de aplicaciones, con el dise\u00f1o y s\u00edntesis de andamios bioactivos, inductores y se\u00f1alizadores ofreciendo una poderosa herramienta biol\u00f3gica para la soluci\u00f3n de\u00a0 los problemas cl\u00ednicos que involucran defectos estructurales y funcionales derivados de enfermedades sist\u00e9micas y lesiones degenerativas8,9<\/sup> en terapias de reparaci\u00f3n, regeneraci\u00f3n y sustituci\u00f3n tisular.<\/p>\n

De las familias de DSCs, la poblaci\u00f3n de DPSCs resulta muy evidente; la caracter\u00edstica m\u00e1s representativa, es su capacidad elevada de regeneraci\u00f3n tanto del complejo dentino-pulpar, as\u00ed como su potencialidad de diferenciaci\u00f3n, aplicables en terapias regenerativas en padecimientos como diabetes mellitus, enfermedades neurol\u00f3gicas y lesiones de tejido \u00f3seo y cartilaginoso10,11<\/sup>.<\/p>\n

Desde sus or\u00edgenes hasta la actualidad, la terapia celular se ha sustentado en la administraci\u00f3n de c\u00e9lulas indiferenciadas con alto grado de especializaci\u00f3n; de igual forma, en el reemplazo de las c\u00e9lulas da\u00f1adas por c\u00e9lulas sanas, para la reparaci\u00f3n de los tejidos afectados, mediante mecanismos similares a los que de forma natural se establecen el organismo para la renovaci\u00f3n de las poblaciones celulares, radicando en ello, la importancia de su estudio y el prop\u00f3sito de esta investigaci\u00f3n.<\/p>\n

MATERIALES Y M\u00c9TODOS.<\/strong><\/p>\n

Se realiz\u00f3 un estudio prospectivo basado en la recolecci\u00f3n, an\u00e1lisis e interpretaci\u00f3n de resultados, ver imagen no<\/sup>1: dise\u00f1o experimental del proceso de obtenci\u00f3n y validaci\u00f3n de c\u00e9lulas madre de pulpa dental (al final del art\u00edculo). El modelo experimental desarrollado para la obtenci\u00f3n de las muestras de DPSCs de dientes permanentes corresponde al siguiente:<\/p>\n

A.\u00a0\u00a0\u00a0 Obtenci\u00f3n de la muestra.<\/p>\n

Para la determinaci\u00f3n de la muestra o pieza dentaria se establecieron criterios de inclusi\u00f3n y exclusi\u00f3n, que incluyen tanto caracter\u00edsticas anat\u00f3micas, como tambi\u00e9n las condiciones cl\u00ednicas que la misma debe presentar12<\/sup>, ver tabla no<\/sup>1: criterios de selecci\u00f3n de las piezas dentarias (al final del art\u00edculo).<\/p>\n

La extracci\u00f3n simple o tratamiento quir\u00fargico de los terceros molares se llevaron siguiendo los protocolos establecidos, referente a la metodolog\u00eda de trabajo, manejo y normas de bioseguridad13<\/sup>. Dentro de los par\u00e1metros incluidos para tal protocolo se enlistan los siguientes: historia cl\u00ednica m\u00e9dico-odontol\u00f3gica, serie radiogr\u00e1fica completa; el material de trabajo que incluye anestesia t\u00f3pica (benzoca\u00edna t\u00f3pica al 20%), cartucho de anestesia local de infiltraci\u00f3n (lidoca\u00edna HCl 2%, epinefrina 1:1000,000 o en su caso lidoca\u00edna HCl 2% sin vaso constrictor); el instrumental de trabajo que incluye elevadores y f\u00f3rceps dentales (de acuerdo a la zona a realizar la exodoncia) y las t\u00e9cnicas de anestesia y cirug\u00eda de acuerdo con el cuadrante de trabajo14<\/sup>. Para el mantenimiento de la integridad pulpar y reducir el riego de contaminaciones cruzadas se implement\u00f3 un soporte higi\u00e9nico al paciente, basado en la realizaci\u00f3n de un tratamiento profil\u00e1ctico que incluye la fase 1 periodontal y enjuague antis\u00e9ptico bactericida y fungicida con 10 mL de Clorhexidina al 0,12%.<\/p>\n

B.\u00a0\u00a0\u00a0 Procesamiento de la muestra.<\/p>\n

Realizada la exodoncia, las muestras se resguardaron en un contenedor pl\u00e1stico rotulado, est\u00e9ril y de cierre herm\u00e9tico, que adem\u00e1s de almacenar, permite un adecuado transporte, para la conservaci\u00f3n de las muestras; en ambos casos inicialmente se conservaron a una temperatura de 4 o<\/sup>C por un periodo de 4 a 6 horas, para posteriormente continuar con la extirpaci\u00f3n y segmentaci\u00f3n de las muestras pulpares, ver imagen no<\/sup>2: soluci\u00f3n enriquecida de almacenamiento y transporte (al final del art\u00edculo).<\/p>\n

La odontosecci\u00f3n se realiz\u00f3 a nivel del cuello anat\u00f3mico del diente, separando as\u00ed la corona anat\u00f3mica (para la obtenci\u00f3n de la pulpa cameral) de la ra\u00edz (para la obtenci\u00f3n de la pulpa radicular) y mediante la t\u00e9cnica de fragmentaci\u00f3n por explantes se obtuvieron muestras de 1mm2<\/sup> de tejido pulpar por muestra \u00edntegra siguiendo posteriormente con el cultivo de las muestras obtenidas, ver imagen no<\/sup>3: obtenci\u00f3n de la muestra de tejido pulpar (al final del art\u00edculo).<\/p>\n

C.\u00a0\u00a0\u00a0 Desarrollo del cultivo celular.<\/p>\n

Un total de 12 a 16 explantes pulpares de 1 mm2<\/sup> se colocaron en cada caja de cultivo siguiendo las especificaciones de la t\u00e9cnica de siembra por cuadr\u00edcula, creando un espacio adecuado entre cada uno de los explantes y dejando reposar por 5 minutos, asegurando la adherencia a la base de la caja, posteriormente se adicion\u00f3 el medio de cultivo suplementado DMEM, ver imagen no<\/sup>4: siembra por explante en cuadriculado (al final del art\u00edculo). Los explantes pulpares sembrados se incubaron en una atm\u00f3sfera del CO2<\/sub> al 5% con una temperatura de 37o<\/sup>C, posterior a la siembra, durante el tiempo de incubaci\u00f3n, el medio de cultivo suplementado fue reemplazo peri\u00f3dicamente, retir\u00e1ndose en su totalidad por aspiraci\u00f3n al vac\u00edo, seguido del reposo de 5 minutos para adherencia superficial del explante y finalmente la suplementaci\u00f3n con 5 mL del medio de cultivo modificado y enriquecido; este sistema de mantenimiento se program\u00f3 por semana de cultivo.<\/p>\n

D.\u00a0\u00a0\u00a0 Validaci\u00f3n del crecimiento celular.<\/p>\n

Se llevaron a cabo dos t\u00e9cnicas de validaci\u00f3n, morfol\u00f3gica para corroborar crecimiento celular e inmunohistoqu\u00edmica para la identificaci\u00f3n estromal y estructural de las c\u00e9lulas madre pulpares. Mediante el uso de microscop\u00eda \u00f3ptica invertida, permiti\u00f3 establecer la identificaci\u00f3n celular por su estructura o forma, as\u00ed como tambi\u00e9n por los conglomerados celulares desarrollados y establecidos por las clonas de c\u00e9lulas madre.<\/p>\n

La determinaci\u00f3n del reconocimiento estromal y estructural se realiz\u00f3 mediante la validaci\u00f3n inmunohistoqu\u00edmica por inmunomarcaje, determinando la expresi\u00f3n de anticuerpos monoclonales y policlonales que reaccionan con ant\u00edgenos de superficie y fluor\u00f3foros, detectable mediante el empleo de t\u00e9cnicas microsc\u00f3picas de fluorescencia15, 16<\/sup>.<\/p>\n

Se implementaron dos mecanismos de inmunomarcaje, el primero, de acuerdo al tipo de reacci\u00f3n ant\u00edgeno-anticuerpo, basado en tres v\u00edas, la v\u00eda directa donde el marcador o anticuerpo primario se acopla de forma directa al ant\u00edgeno, la v\u00eda indirecta donde el marcador o anticuerpo primario para acoplarse al ant\u00edgeno requiere de la presencia de un anticuerpo secundario y la v\u00eda por amplificaci\u00f3n donde el marcador o anticuerpo primario se une a un agente amplificador (medio de detecci\u00f3n) el cual le permite reaccionar con el ant\u00edgeno (agente colorante o fluor\u00f3foro), por otra parte, el segundo mecanismo corresponde al n\u00famero de anticuerpos empleados17, 18<\/sup> del cual destaca el inmunomarcaje triple que se basa en el uso de anticuerpos de reconocimiento celular, reconocimiento estructural\u00a0 y mol\u00e9culas fluorescentes de amplificaci\u00f3n, siendo \u00e9ste, el utilizado en la validaci\u00f3n inmunohistoqu\u00edmica para las clonas de DPSCs obtenidas.<\/p>\n

III. RESULTADOS.<\/strong><\/p>\n

Reconocimiento estructural.<\/em><\/strong><\/p>\n

Se realiz\u00f3 la validaci\u00f3n morfol\u00f3gica a partir del tercer d\u00eda de siembra, siendo posible establecer la identificaci\u00f3n positiva, donde se muestra la caracter\u00edstica estructural propia de las DPSCs en un cultivo in vitro<\/em> observ\u00e1ndose una morfolog\u00eda fibrobl\u00e1stica y la formaci\u00f3n t\u00edpica de colonias circulares19<\/sup>, ver imagen no<\/sup>5: valoraci\u00f3n morfol\u00f3gica del crecimiento celular DPSCs, 3, 5 y 7 d\u00edas de siembra (al final del art\u00edculo).<\/p>\n

B.\u00a0\u00a0\u00a0 Viabilidad celular.<\/p>\n

Para la valoraci\u00f3n de la viabilidad celular de los cultivos de c\u00e9lulas madre de pulpa dental se emple\u00f3 un kit vida y muerte celular estandarizado (LIVE\/DEAD<\/strong>\u00ae<\/sup>. Cell Viability Assays. Life Technologies<\/em>™) el cual permite la determinaci\u00f3n f\u00e1cil y sensible de la viabilidad celular, la\u00a0 citotoxicidad de compuestos, el medio en que se desarroll\u00f3 el cultivo y las condiciones en que se realiz\u00f3 el mismo20, 21<\/sup>. El resultado se establece debido al marcaje celular por la fijaci\u00f3n del fluor\u00f3foro o colorante a receptores membranales o citoplasm\u00e1ticos, expres\u00e1ndose las membranas celulares integras de color verde estableciendo con ello complejos celulares activos mit\u00f3ticamente y marcando de color rojo por la fijaci\u00f3n del fluor\u00f3foro a receptores citoplasm\u00e1ticos intracelulares para las c\u00e9lulas en etapa de apoptosis o restos celulares, determin\u00e1ndose con ello la viabilidad de los cultivos celulares por mantenimiento de la integridad celular y confluencia, ver imagen no<\/sup>6: viabilidad celular: test de vida y muerte (al final del art\u00edculo).<\/p>\n

C.\u00a0\u00a0\u00a0 Reconocimiento estromal.<\/p>\n

Para la identificaci\u00f3n positiva a c\u00e9lulas madre se estableci\u00f3 el ensayo inmunohistoqu\u00edmico de reconocimiento y amplificaci\u00f3n para c\u00e9lulas madre mesenquimales por detecci\u00f3n del marcador espec\u00edfico STRO-122<\/sup> y los marcadores de membrana ALEXA F594 y Cy5, estableci\u00e9ndose el que las c\u00e9lulas presentes en los cultivos celulares corresponden a clonas de c\u00e9lulas madre derivadas de pulpa dental, ver imagen no<\/sup>7: reconocimiento estromal positivo (al final del art\u00edculo).<\/p>\n

D.\u00a0\u00a0\u00a0 Reconocimiento estructural.<\/strong><\/p>\n

Mediante el uso de marcadores estructurales (vinculina, faloidina y sytox) se revelan las diferentes estructuras y organelos presentes en las muestras celulares derivadas de los cultivos pulpares, tales como el citoesqueleto que permite la interacci\u00f3n y comunicaci\u00f3n intercelular, as\u00ed como las membranas nucleares y su actividad mit\u00f3tica. Los cultivos celulares obtenidos muestran estructuras del citoesqueleto correspondientes a filopodios o microesp\u00edculas y lamelipodios, que son estructuras transmembranales m\u00faltiples asociadas al citoesqueleto de actina cuyo objetivo es establecer v\u00edas de adhesi\u00f3n y organizaci\u00f3n celular (c\u00e9lula-c\u00e9lula) propias de la generaci\u00f3n de microambientes, as\u00ed como tambi\u00e9n la actividad nuclear por el reconocimiento de la integridad de las membranas nucleares que generalmente corresponden a complejos activos mit\u00f3ticamente, ver imagen no<\/sup>8: identificaci\u00f3n de componentes estructurales b\u00e1sicos (al final del art\u00edculo).<\/p>\n

CONCLUSIONES.<\/strong><\/p>\n

La tendencia actual en cuanto a la terap\u00e9utica est\u00e1 dirigida a la soluci\u00f3n integral de afecciones o padecimientos \u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 que afectan y deterioran la calidad de vida de las personas ya que los tratamientos ante afecciones agresivas son muy radicales y los resultados adem\u00e1s de ser reservados, son dolorosos y con bajas expectativas de recuperaci\u00f3n integral.<\/p>\n

Las c\u00e9lulas madre cumplen un papel vital en esta sinergia entre campos de estudio, pero su medio de obtenci\u00f3n en cuanto a la naturaleza de la muestra y el manejo de estas para su producci\u00f3n y proliferaci\u00f3n, han detenido el avance en cuanto al estudio de sus aplicaciones y beneficios. Es por eso por lo que las c\u00e9lulas madre mesenquimales de origen dental est\u00e1n revolucionando el estudio de la terap\u00e9utica celular y su modelo aplicativo en la terapia regenerativa.<\/p>\n

Los resultados obtenidos, indican que las muestras obtenidas a partir de la fragmentaci\u00f3n y explantes de pulpas dentales humanas, son capaces de originar poblaciones celulares que expresan su capacidad de divisi\u00f3n y proliferaci\u00f3n originando con ello clonas de c\u00e9lulas mesenquimales adultas de pulpa dental (DPSCs) evidenciadas por las caracter\u00edsticas estructurales propias de las mismas, as\u00ed como tambi\u00e9n por mostrar marcadores t\u00edpicos expresados en las validaciones inmunohistoqu\u00edmicas.<\/p>\n

Sin embargo, es necesario implementar validaciones y ensayos de comportamiento celular, basados en la expresi\u00f3n de la actividad del citoesqueleto de las c\u00e9lulas asiladas el cual es un factor determinante de las v\u00edas de comunicaci\u00f3n celular para determinar la interacci\u00f3n de las c\u00e9lulas cultivadas y aisladas en un ambiente biol\u00f3gico para medir as\u00ed, su grado de proliferaci\u00f3n, inducci\u00f3n y diferenciaci\u00f3n en un uso potencialmente cl\u00ednico en terapias de reparaci\u00f3n y regeneraci\u00f3n tisular.<\/p>\n

Ver anexo<\/a><\/strong><\/h2>\n

BIBLIOGRAF\u00cdA<\/strong><\/p>\n

    \n
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