{"id":66329,"date":"2012-11-10T11:49:02","date_gmt":"2012-11-10T10:49:02","guid":{"rendered":"https:\/\/www.revista-portalesmedicos.com\/revista-medica\/?p=66329"},"modified":"2022-03-17T10:53:16","modified_gmt":"2022-03-17T09:53:16","slug":"evaluacion-del-conjugado-anti-igg-humana-fitc-en-hospitales-de-las-provincias-orientales","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.revista-portalesmedicos.com\/revista-medica\/evaluacion-del-conjugado-anti-igg-humana-fitc-en-hospitales-de-las-provincias-orientales\/","title":{"rendered":"Evaluaci\u00f3n del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC en hospitales de las provincias orientales"},"content":{"rendered":"<p style=\"text-align: justify;\" align=\"justify\"><span style=\"font-family: Arial; font-size: small;\"><strong>Evaluaci\u00f3n del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC en hospitales de las provincias orientales<\/strong><\/span><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\" align=\"justify\"><span style=\"font-family: Arial; font-size: small;\">Las enfermedades autoinmunes se caracterizan por la alteraci\u00f3n de los mecanismos de tolerancia inmunol\u00f3gica, en particular por la producci\u00f3n de anticuerpos que reconocen estructuras o ant\u00edgenos propios, como por ejemplo, los anticuerpos antinucleares (ANA). <\/span><!--more--><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\" align=\"justify\"><span style=\"font-family: Arial; font-size: small;\">Sandra Rivera Infante. Lic. Ciencias Farmac\u00e9uticas. Especialista III en Innovaci\u00f3n, Investigaci\u00f3n y Desarrollo.<br \/>\nTec. Juan Francisco Alem\u00e1n de las Cuevas<\/span><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Rep\u00fablica de Cuba. Santiago de Cuba. CIM \u2013 LABEX<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">\u00cdndice:<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Resumen \u2013 Palabras clave<br \/>\nIntroducci\u00f3n<br \/>\nObjetivo<br \/>\nMateriales y M\u00e9todos<br \/>\nResultados y Discusi\u00f3n<br \/>\nConclusiones<br \/>\nReferencias Bibliogr\u00e1ficas<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Resumen<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Las enfermedades autoinmunes se caracterizan por la alteraci\u00f3n de los mecanismos de tolerancia inmunol\u00f3gica, en particular por la producci\u00f3n de anticuerpos que reconocen estructuras o ant\u00edgenos propios, como por ejemplo, los anticuerpos antinucleares (ANA) la mayor\u00eda de los laboratorios distribuidos mundialmente utilizan para detectar ANA la t\u00e9cnica de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) que se realiza sobre cortes congelados de h\u00edgado o ri\u00f1\u00f3n de rata y\/o monocapas de c\u00e9lulas tumorales mantenidas en cultivo (HEP-2) de Crithidia Lucillae.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">En el Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX) se comenz\u00f3 la investigaci\u00f3n del Conjugado Anti \u2013 IgG humana -FITC, el mismo se utiliza en la detecci\u00f3n de los anticuerpos antinucleares (ANA), su determinaci\u00f3n constituye el an\u00e1lisis de primera elecci\u00f3n para el diagn\u00f3stico del lupus eritematoso sist\u00e9mico (LES) y de las enfermedades del tejido conectivo. Se evaluaron los lotes de conjugados 2502, 2503 y 2504 en: Hospital provincial de Las Tunas Ernesto Guevara de la Serna, Facultad de Ciencias M\u00e9dicas, Dpto. de Inmunolog\u00eda en Holgu\u00edn y Hospital Celia S\u00e1nchez Manduley en Manzanillo. Se logr\u00f3 un impacto positivo de la investigaci\u00f3n con la demostraci\u00f3n del buen desempe\u00f1o del conjugado anti IgG humana \u2013 FITC, frente a pacientes en diferentes instituciones con experiencia en el desarrollo de t\u00e9cnicas inmunol\u00f3gicas.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Palabras clave: ANA, LES, conjugado, anticuerpos, FITC<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Abstract<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Autoimmune diseases are characterized by altered immunological tolerance mechanisms, in particular for the production of antibodies that recognize there own antigens or structures, such as antinuclear antibodies (ANA) most laboratories distributed on the world used to detect ANA the indirect immunofluorescence (IFI) performed on frozen sections of rat or kidney liver and tumor cell monolayers maintained in culture (HEP-2) of Crithidia Lucilliae.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">In the Laboratory of Experimental Biomodels Antibodies (LABEX) began the research of conjugated Anti &#8211; human IgG &#8211; FITC, this is used in the detection of antinuclear antibodies (ANA), its determination is the first choice analysis of the diagnosis of LES and connective tissue diseases. The conjugates lots 2502, 2503 and 2504 were evaluated on: Provincial Hospital of Las Tunas \u00abErnesto Guevara de la Serna\u00ab, Dept. of Immunology in Faculty of Medicine, Holguin Hospital Celia Sanchez in Manzanillo. The investigation research achieved a positive impact whit the demonstration of the good performance of conjugated Anti &#8211; human IgG \u2013 FITC, in patients of different institutions with expertise in the development of immunological techniques.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Keywords: conjugated, antibody, FITC, antinuclear antibodies<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Introducci\u00f3n<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Las enfermedades autoinmunes se caracterizan por la alteraci\u00f3n de los mecanismos de tolerancia inmunol\u00f3gica, en particular por la producci\u00f3n de anticuerpos que reconocen estructuras o ant\u00edgenos propios, como por ejemplo, los anticuerpos antinucleares (ANA). Estos autoanticuerpos se hallan altamente asociados a diferentes enfermedades del tejido conectivo y en algunas ocasiones a enfermedades hep\u00e1ticas autoinmunes. Si bien existen signos y s\u00edntomas caracter\u00edsticos de cada una de ellas, hay un grupo de pacientes que comienzan con sintomatolog\u00eda general inespec\u00edfica, por este motivo la detecci\u00f3n de ANA y la correcta identificaci\u00f3n de la imagen puede ser muy \u00fatil para definir u orientar hacia una enfermedad en particular.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Actualmente, la mayor\u00eda de los laboratorios distribuidos mundialmente utilizan para detectar ANA la t\u00e9cnica de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) que se realiza sobre cortes congelados de h\u00edgado o ri\u00f1\u00f3n de rata y\/o monocapas de c\u00e9lulas tumorales mantenidas en cultivo (HEP-2) de Crithidia Lucillae. La diferencia entre estos dos tipos de sustratos antig\u00e9nicos est\u00e1 en la cantidad de ant\u00edgenos nucleares que tienen y por consiguiente la posibilidad de detectar o no un anticuerpo en el suero del paciente con enfermedad reum\u00e1tica, y \/o Lupus Eritematoso Sist\u00e9mico (LES). Los diferentes autoanticuerpos producen im\u00e1genes que pueden diferenciarse entre s\u00ed por patrones de tinci\u00f3n, los cuales son:<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Perif\u00e9rico: En pacientes con enfermedades del tejido conectivo.<br \/>\nMoteado: Asociado al lupus eritematoso sist\u00e9mico, enfermedad mixta del tejido conectivo, s\u00edndrome de Sj\u00f6gren, polimiositis o escleroderma.<br \/>\nNucleolar: En aproximadamente un 50-70% de pacientes con solapamiento de escleroderma y polimiositis\/dermatomiositis. Se presenta en hasta un 33% de pacientes con escleroderma sist\u00e9mica, especialmente con complicaciones renales.<br \/>\nCentrom\u00e9rico: En pacientes con esclerosis sist\u00e9mica, especialmente en la forma de la enfermedad con implicaci\u00f3n cut\u00e1nea (80%). Ocasionalmente, en otras enfermedades conectivas.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">M\u00e1s de cinco millones de personas en el mundo, en su mayor\u00eda mujeres, se enfrentan a un futuro incierto, luchan cada d\u00eda con las consecuencias discapacitantes que sobre su salud provoca el LES, una enfermedad autoinmune cr\u00f3nica que ocasiona que el sistema inmunitario ataque a los tejidos de su propio organismo y que puede poner en riesgo la vida del paciente. Frente a las posibles apoplej\u00edas (accidentes cerebro-vasculares), infartos, dolores discapacitantes y fatiga, manchas cut\u00e1neas y otros problemas de salud asociados con esta enfermedad cr\u00f3nica sobre todo en los primeros a\u00f1os de la enfermedad, las personas con LES en todo el mundo se han unido para reclamar el fomento en su investigaci\u00f3n, tratamientos m\u00e1s efectivos y seguros y la mejora de los servicios de atenci\u00f3n sanitaria. En Cuba se evidencia la mejor\u00eda progresiva de las curvas de supervivencia desde la d\u00e9cada de 1950 hasta la actualidad. Sin embargo, es significativa la morbilidad producida por diversas manifestaciones de la enfermedad durante su evoluci\u00f3n y por los efectos de los tratamientos necesarios para controlarlas.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">En el Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX) se comenz\u00f3 la investigaci\u00f3n del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC, el mismo se utiliza en la detecci\u00f3n de los anticuerpos antinucleares (ANA), su determinaci\u00f3n constituye el an\u00e1lisis de primera elecci\u00f3n para el diagn\u00f3stico del LES y de las enfermedades del tejido conectivo.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Objetivo: Evaluar el Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC producido en LABEX en hospitales de las provincias orientales.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Materiales y M\u00e9todos<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Diagrama de producci\u00f3n del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">\uf0d8 Primera etapa: Obtenci\u00f3n del inmun\u00f3geno:<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">1. Extracci\u00f3n de suero humano<br \/>\n2. Purificaci\u00f3n de IgG humana<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">\uf0d8 Segunda etapa: Obtenci\u00f3n del suero hiperinmune.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">1. Inmunizaci\u00f3n del biomodelo.<br \/>\n2. Monitorizaci\u00f3n de la respuesta inmune.<br \/>\n3. Extracci\u00f3n de suero de carnero<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">\uf0d8 Tercera etapa: Purificaci\u00f3n del anticuerpo anti IgG humana.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">1. Cromatograf\u00eda de afinidad con prote\u00edna A.<br \/>\n2. Di\u00e1lisis del anticuerpo con PBS.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">\uf0d8 Cuarta etapa: Conjugaci\u00f3n del anticuerpo anti IgG humana con FITC.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">1. Di\u00e1lisis del anticuerpo con Buffer Carbonato.<br \/>\n2. Mezcla y purificaci\u00f3n del conjugado.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">\uf0d8 Quinta etapa: Determinaci\u00f3n de la actividad biol\u00f3gica del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\"><span style=\"font-family: Arial; font-size: small;\">Evaluaci\u00f3n del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC<\/span><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Se realiz\u00f3 la evaluaci\u00f3n del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC mediante el montaje de la t\u00e9cnica IFI sobre l\u00e1minas de ANA (cortes de h\u00edgado de rata) las instituciones participantes fueron Hospital provincial de Las Tunas Ernesto Guevara de la Serna, Facultad de Ciencias M\u00e9dicas Dpto. Inmunolog\u00eda en Holgu\u00edn y Hospital Celia S\u00e1nchez Manduley en Manzanillo.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Se evaluaron tres lotes del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC en diferentes estados: 2502 formulado como producto final ,2503 puro y 2504 puro en diferentes diluciones. Para los ensayos realizados se usaron sueros de pacientes controles conocidos, positivos y negativos.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Resultados y discusi\u00f3n<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Los resultados obtenidos fueron satisfactorios mostrando que el producto cuenta con los requisitos necesarios para su utilizaci\u00f3n, en el apoyo diagn\u00f3stico de enfermedades autoinmunes y su diferenciaci\u00f3n en base al patr\u00f3n expresado por el paciente. Ver tablas 1,2 y 3.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Se observ\u00f3 que la intensidad de la fluorescencia es dependiente fundamentalmente de tres factores de gran importancia: del reactivo conjugado, del microscopio usado, as\u00ed como del estado t\u00e9cnico del mismo. Esto se debe a que cada conjugado tiene una concentraci\u00f3n diferente en su estado puro el cual se logra estandarizar en el proceso de formulaci\u00f3n en base a su actividad biol\u00f3gica donde se define la diluci\u00f3n optima del producto formulado, la influencia del microscopio usado est\u00e1 en que en dependencia de la l\u00e1mpara de fluorescencia que presente puede tener mayor o menor intensidad de fluorescencia con respecto a otras marcas comerciales, del estado de conservaci\u00f3n y de la limpieza del microscopio depender\u00e1 su visibilidad, porque los filtros que este equipo contiene en su interior son susceptibles al ataque de microorganismo.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Tabla 1. Resultados del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC obtenidos en Las Tunas.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">\n<p style=\"text-align: justify;\" align=\"center\"><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter\" title=\"conjugado_antiIgG_humana\/positivo_fluorescencia_baja\" src=\"http:\/\/www.portalesmedicos.com\/imagenes\/publicaciones_12\/1211_conjugado_antiIgG_humana\/positivo_fluorescencia_baja.jpg\" alt=\"conjugado_antiIgG_humana\/positivo_fluorescencia_baja\" width=\"452\" height=\"162\" align=\"bottom\" border=\"0\" \/><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\" align=\"justify\">Tabla 2. Resultados del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC obtenidos en Holgu\u00edn.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\" align=\"center\"><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter\" title=\"conjugado_antiIgG_humana\/buena_alta_fluorescencia\" src=\"http:\/\/www.portalesmedicos.com\/imagenes\/publicaciones_12\/1211_conjugado_antiIgG_humana\/buena_alta_fluorescencia.jpg\" alt=\"conjugado_antiIgG_humana\/buena_alta_fluorescencia\" width=\"479\" height=\"124\" align=\"bottom\" border=\"0\" \/><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\" align=\"justify\">Tabla 3. Resultados del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC obtenidos en Manzanillo.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\" align=\"center\"><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter\" title=\"conjugado_antiIgG_humana\/ANA_positivo_patrones\" src=\"http:\/\/www.portalesmedicos.com\/imagenes\/publicaciones_12\/1211_conjugado_antiIgG_humana\/ANA_positivo_patrones.jpg\" alt=\"conjugado_antiIgG_humana\/ANA_positivo_patrones\" width=\"388\" height=\"114\" align=\"bottom\" border=\"0\" \/><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\" align=\"justify\">Conclusiones<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">1. Se logr\u00f3 un impacto positivo de la investigaci\u00f3n con la demostraci\u00f3n del buen desempe\u00f1o del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC, frente a pacientes en diferentes instituciones con experiencia en el desarrollo de t\u00e9cnicas inmunol\u00f3gicas.<br \/>\n2. Las instituciones participantes mostraron inter\u00e9s en la adquisici\u00f3n del reactivo conjugado para el mantenimiento del servicio a pacientes con sospecha de enfermedades autoinmunes.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\"><span style=\"font-size: xx-small;\"><strong>Referencias Bibliogr\u00e1ficas<\/strong><\/span><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">1. Inmunoan\u00e1lisis Aurora Galv\u00e1n Cejudo, Isaac T\u00fanez Fi\u00f1ana<br \/>\n2. Handbook Immunochemical Staining Methods. Edited By Sally J. Naish. Dako Corporation.California. Usa. 1989<br \/>\n3. Anticuerpos Antinucleares, Im\u00e1genes Y Caracter\u00edsticas Obtenidas Por Inmunofluorescencia. Importancia De Los Isotipos Iga, Igm E Igg Miriam Arcavi 1, Jorge Dadone 2 1 laboratorio De Inmunolog\u00eda Cl\u00ednica, Departamento De Bioqu\u00edmica Cl\u00ednica, Facultad De Farmacia Y Bioqu\u00edmica, Hospital De Cl\u00ednicas Jos\u00e9 De San Mart\u00edn, Universidad De Buenos Aires, 2 laboratorio De Reumatolog\u00eda, Centro De Educaci\u00f3n M\u00e9dica E Investigaciones Cl\u00ednicas, Cemic, Buenos Aires<br \/>\n4. Anticuerpos Anti-Nucleares Una Familia Diversa*Laboratorio En La Practica Cl\u00eanica. Carlos A. Javier-Zepeda*Rev Med Hond 2002; 70:189-193<br \/>\n5. Uso Del Laboratorio Reumatol\u00f3gico. Dra. Ver\u00f3nica Mezzano Revista Colombiana De Reumatolog\u00eda. Print Version Issn. 0121-8123.<br \/>\n6. Capacidad De Las C\u00e9lulas Hep-2, Hep-2000\u00ae Inmunofluorescencia Y Hep-2000\u00ae Colorzyme, En La Determinaci\u00f3n De Anas Y Ssa\/Ro En La Evaluaci\u00f3n Inicial En Pacientes Con Enfermedad Del Tejido Conectivo No Diferenciada. Capacity Of Cells Hep-2, Hep-2000\u00ae Immunofluorescence And Hep-2000\u00ae Colorzyme, In The Etermination Of Anas And Ssa\/Ro, In The Initial Evaluation Of Patients With Undifferentiated Connective Tissue Disease.Viviana Guti\u00e9rrez 1, Mar\u00eda C. Romero 2, Oscar J. Felipe 3, Ana Mar\u00eda Santos 4, Rafael Valle O.5, John Londo\u00f1o6<br \/>\n7. Sistema De Detecci\u00f3n Selectiva De Anticuerpos Ana Relisa\u00ae.Para El Uso Profesional N\u00famero De Cat\u00e1logo: 7096-11 (96 Pocillos) Y 7696-11 (576 Pocillos<br \/>\n8. Utilizaci\u00f3n Y Valor Predictivo De La Determinaci\u00f3n De Anticuerpos Antinucleares En Un Hospital De Referencia Nacional De Salud. Dra. Elena Kokuina, 1 Dra. Araceli Chico, 2 Dr. Miguel Est\u00e9vez, 2 Dr. Dionisio P\u00e9rez, 3 Dra. \u00c1ngela Guti\u00e9rrez 4 Y Dr. Celso Cruz 5<br \/>\n9. Obtenci\u00f3n De Un Conjugado Anti Igg De Rat\u00f3n \u2013 Fitc Mediante La Tecnolog\u00eda Igy Para Uso Como Anticuerpo Secundario En La Detecci\u00f3n De Ant\u00edgenos. De Superficie Celular. Esteban J. Guti\u00e9rrez Calzado, Tom\u00e1s Sam\u00f3n Ch\u00e1vez, Alejandro Miranda Ariza, George Fern\u00e1ndez Duarte, David Higginson Clarke,* Gustavo Sierra Gonz\u00e1lez** Y R\u00fcdiger Schade.***Laboratorio De Anticuerpos Y Biomodelos Experimentales, Instituto Superior De Ciencias M\u00e9dicas, Santiago De Cuba. *Departamento De Biolog\u00eda Molecular, Direcci\u00f3n De Neurociencia<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Evaluaci\u00f3n del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC en hospitales de las provincias orientales Las enfermedades autoinmunes se caracterizan por la alteraci\u00f3n de los mecanismos de tolerancia inmunol\u00f3gica, en particular por la producci\u00f3n de anticuerpos que reconocen estructuras o ant\u00edgenos propios, como por ejemplo, los anticuerpos antinucleares (ANA).<\/p>\n","protected":false},"author":2,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"closed","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"categories":[89,133],"tags":[15809,1586,15812,15810,12114,15811,7061],"class_list":["post-66329","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-farmacologia","category-medicina-interna","tag-ana","tag-anticuerpos","tag-anticuerpos-antinucleares","tag-conjugado","tag-enfermedades-autoinmunes","tag-fitc","tag-les","no-featured-image-padding"],"acf":[],"yoast_head":"<!-- This site is optimized with the Yoast SEO plugin v26.6 - https:\/\/yoast.com\/wordpress\/plugins\/seo\/ -->\n<title>Evaluaci\u00f3n del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC en hospitales de las provincias orientales<\/title>\n<meta name=\"description\" content=\"Evaluaci\u00f3n del Conjugado Anti IgG humana \u2013 FITC en hospitales de las provincias orientales Las enfermedades autoinmunes se 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