la apoptosis promueve el aumento del número de células de un tejido instalando la hiperplasia, como ocurre en los tumores y el tejido adiposo.
Según Lijnen, H.R., 2008; citado por Bracco, J. 2012; en ratones transgénicos la disminución de la actividad fibrinolítica en el tejido adiposo se asoció con la reducción de la obesidad inducida por la dieta.
La disminución de la fibrinólisis se relaciona con un descenso de la angiogénesis, un aumento de la apoptosis, y, por ende, una disminución de la adipogénesis; obrando los monómeros de fibrina como marcadores de tales eventos fisiopatológicos.
Según Bracco, J. (2012) una dieta rica en hidratos de carbono incrementó los Productos de Degradación de la Fibrina séricos (PDFs) de las dos horas de la postprandia un 86.60% respecto a otra dieta rica en proteínas; mientras que se observó un aumento de PDFs de 43.34% tras una dieta rica en lípidos.
Los aumentos de PDFs resultan antitrombóticos porque inhiben la agregación plaquetaria.
Según el mismo autor, los PDF aumentaron según lo hizo la insulina, sugiriendo alguna acción antiaterogénica de los mismos. Al parecer, variaron en el mismo sentido que el colesterol de la LDL (LDLc), el cual es trombogénico, pues las cargas electronegativas de las lipoproteínas que lo transportan pueden activar el factor VII de la coagulación con formación de micro coágulos y resolución de los mismos por fibrinólisis, causante del incremento de PDF. Pero, sin embargo, no mostraron un pico junto con el de insulina, sino que continuaron aumentando en la postprandialidad tardía, siendo su manifestación paralela, cuando se lo confrontó con más de 16 analitos metabólicos ensayados, a las variaciones del porcentual de HDLc sialilado (ASHDLc%). Como esta molécula sialilada al igual que el HDLc resultó antiaterogénica (Bracco, J. 2013), quedó demostrado, también, la acción antiaterogénica de los PDF.
2. MÉTODO
Las pruebas para la determinación de complejos solubles de fibrina están basadas en el hecho de que estos son ligeramente menos solubles que el fibrinógeno normal. El plasma es tratado en tal forma que no precipite el fibrinógeno pero los complejos solubles sí (Owen, C.A., Bowie, E. J. W.; 1974. Citado por Mora C. Julio, Porras M. Ana, 1982). Los agentes precipitantes incluyen el frío, la heparina, el etanol y el sulfato de protamina.
Los inmunoensayos con anticuerpos monoclonales pueden ser turbidimétricos o por metodología ELISA; suelen ser métodos más engorrosos, fundamentalmente estos últimos, mucho más caros, y que no se resuelven en el término de 5 minutos como el presente procedimiento, que resultó, entonces, de excelente performance como screening test.
El método empleado en el presente trabajo fue el de gelación por etanol el cual, al ser automatizable, permite una evaluación objetiva, rápida y diaria de pacientes. Por otro lado, resulta ser el método más económico, y con una sensibilidad mayor según aquellos autores, al del sulfato o clorhidrato de protamina.
Se empleó suero en lugar de plasma, que aumenta la especificidad del método al estar ausente el fibrinógeno, el cual es el principal analito que suele incrementar falsamente los valores de los monómeros de fibrina.
En consecuencia, se efectuó el presente estudio con un método de elaboración propia, barato, sensible, específico, automatizable, muy rápido, y cuyo valor de corte no depende de la observación subjetiva del analista, sino de la diferencia de luz detectada por el coagulómetro en el segundo de producirse la precipitación de los monómeros.
3. MATERIALES E INSTRUMENTOS
- Etanol
- Agua destilada
- Sueros sanguíneos
- Pool de sueros controles
- Auto analizador M2100
- Reactivo: EtOH al 50%
- 4. FICHA TÉCNICA DEL MÉTODO AUTOMÁTICO
Tipo: Color
Referencia: Factor
Longitud de onda: 660 mµ
Muestra: 50 µl
1º Reactivo: 400 µl
1º Incubación: 5 minutos
Límite inferior: 0 µg/ml
Límite superior: 10 µg/ml
Límite lineal: 15 µg/ml
L. blanco/sustrato: 0.200
Factor: 37
Cálculo: 1
Parámetros funcionales:
- Velocidad de dispensado: 15
- Posición del fotómetro: 44
- Volumen de lavado: 1600
- Volumen de dilución: 150
- Pasos abajo disponibles: 855
- Posición dispensado suero: 80
- Tiempo de integración: 0.250
- Rechupe de gota: 100
- Absorbancia mínima: 0.050
- Absorbancia máxima: 1.750
- Velocidad aspiración: 15
- Límite de rechazo: 0.175
- Tiempo máximo coagulación: 600
- Umbral de coagulación: 0.050
5. RESULTADOS
Se efectuó la determinación de monómeros de fibrina a 51 pacientes de una población general, sin criterios de inclusión y exclusión, con el propósito de orientar la búsqueda de material relacionado con el tema (Tabla nº 1).
Se determinó conjuntamente triglicéridos (TG), HDLc, y otros analitos, según el historial del paciente y el diagnóstico presuntivo; y se calculó el Índice de Resistencia a la Insulina del cociente TG/HDLc, y un Índice optimizado de Resistencia a la insulina